Дерматология мелких домашних животных — Зооинформ

Что нужно помнить владельцу кошки (собаки) о коже питомца.

Соскоб кожи должен выполнятся у собак и кошек во всех случаях алопеции или шелушения кожи. Соскоб выполняется при помощи лезвия скальпеля (№ 20 с рукояткой или без нее) или кюреткой (например, двойной ложкой Фолькмана и диаметром 5-7 мм). Кожу на выбранном участке нужно захватить зажимом и увлажнить каплей вазелинового масла.

Зажав кожную складку между большим и указательным пальцами, нужно надавить на складку, сдавливая волосяные фолликулы, а затем несколько раз подряд произвести соскоб в направлении роста волос по тому же участку лезвием кюретки, держа инструмент под углом 45-90°. Спорифицированный материал для пробы нужно собрать на лезвие скальпеля.

https://www.youtube.com/watch?v=ytadvertisede

Затем сделать мазок из этого соскоба на предметное стекло и при необходимости добавить в него еще одну каплю вазелинового масла. Затем данная проба превращается в эмульсию с помощью масла на предметном стекле до тех пор, пока не станет однородной, после чего покрывается покровным стеклом (лучше всего размером 2×2см), и полученная проба тщательно проверяется под микроскопом с 4- и 10-кратным увеличением.

Владельцы часто задают вопрос, нужно ли производить дезинфекцию участка соскоба; но, хотя в этом и нет необходимости, будет полезно произвести легкую дезинфекцию. В ветеринарной практике используются различные методы кожного соскоба, в зависимости от предполагаемых эктопаразитов. При исследовании кожного покрова на наличие клещей рода Demodexили личинок Pelodera,которые живут в волосяных фолликулах, нужно выполнить от 1 до 3 соскобов.

Соскоб выполняют до появления капель крови (глубокий соскоб кожи). Соскоб кожи трудно произвести у животного с пододемодекозом из-за сильной болезненности данной процедуры, и даже при очень поверхностном соскобе возникает кровотечение вследствие воспаления и отека. В этом случае рекомендуется выполнить выдергивание волоса (см.

Взятие соскоба с необходимой глубины представляет большие сложности или вообще невозможен для собак породы шарпей из-за слишком толстой дермы, характерной для этой породы. В данном случае, если имеется подозрение на демодекоз, а кожный соскоб дал отрицательные результаты, нужно произвести биопсию кожи для гистопатологического исследования.

При клещах Sarcoptesу собак соскоб кожи следует выполнять с большого участка (желательно 20 см2). Осторожно выбрив шерстный покров электрической машинкой, проводят поверхностный соскоб кожи, стараясь взять как можно больше чешуек для микроскопического исследования. В данном случае нет необходимости производить соскоб до появления капель крови.

Лучшими участками для соскоба являются кожа в области наружной поверхности ушных раковин, на латеральной поверхности локтевой области и в любом другом месте, где имеются толстые чешуйки, узелки и желтые струпья. В кожных соскобах больных животных не всегда содержатся Sarcoptes, яйца и продукты их жизнедеятельности, даже если соскоб выполнен правильно. Поэтому отрицательный результат соскоба кожи не исключает наличие (зудневой) чесотки.

При чесотке у кошек легко найти клещей рода Notoedres,которые в изобилии содержатся в кожных соскобах. Эти соскобы нужно производить так же, как это было описано при саркоптозе у собак. Также можно выполнить поверхностный соскоб кожи для взятия чешуек, если имеется подозрение на заражение Cheyletiella, но этот метод является менее чувствительным, чем отпечаток на ацетатной пленке или сбор чешуек частым гребнем.

И наконец, можно сделать осторожный соскоб с поверхности кожи, особенно в случаях жирной себореи, для взятия мазка, который наносится на предметное стекло, окрашивается и исследуется на наличие Malassezia (см. обсуждение микроскопического исследования чешуек). Кроме вазелинового масла можно также использовать хлорфенолак (таблица 2) или 10-20%-ный раствор гидроксида калия (КОН).

Эти вещества используются главным образом при обнаружении грибковых поражений. Вышеназванные вещества оказывают токсичное и раздражающее действие на кожу; поэтому кожный соскоб нужно выполнять сухим лезвием, а пробу после перемешать с каплей хлорфенолака или КОН на предметном стекле. Препарат, приготовленный с помощью КОН, нужно слегка разогреть на пламени горелки в течение 30 секунд или дать ему постоять 30 минут при комнатной температуре перед микроскопическим исследованием. Исследование препаратов с хлорфенолаком можно производить сразу же без подогревания.

Кожа является самым большим и, к тому же, видимым органом тела. Этот орган имеет «самостоятельные», «свои собственные» заболевания кожи, иногда не связанные с отражением состояния внутренних органов. Заболевания кожи у домашних животных встречаются очень часто и являются наиболее досаждающими проблемами, так как связаны не только с изменениями внешнего вида любимца, но и со значительным его беспокойством.

Дополнительный риск создают болезни кожи, способные передаваться людям.

Среди заболеваний кожи выделяют: паразитарные, бактериальные, грибковые, вирусные, аллергические, аутоиммунные и иммуноопосредованные, эндокринологические, новообразования кожи, генетические и другие.

Трихография

Микроскопическое исследование шерстного покрова является ценным методом, все чаще применяемым и играющим вспомогательную роль для других исследований (таблица 3). Волосы для пробы выдергивают из фолликулов в направлении роста волоса с помощью небольшого кровоостанавливаюгциего зажима с насадками резины на его браншах.

Резиновые насадки на концах зажимов необходимы для того, чтобы захватывать волос на всех стадиях его развития, а не только на стадии телогена, когда он наиболее легко поддается депиляции. Затем волос помещают на каплю вазелинового масла, хлорфенолака или 10-20% раствора КОН на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Или можно закрепить собранную пробу с помощью чистой ацетатной ленты на предметном стекле.

Трихография помогает при диагностике демодекоза, поскольку очень часто клещи извлекаются из фолликулов вместе с волосом, и их можно легко распознать под микроскопом с 4- или 10-кратным увеличением. Данный метод помогает также диагностировать дерматофитию, если внутри или на волосяных стержнях видны споры или гифы грибов.

Данный тест является положительным в 60-70% случаев дерматофитии. Однако нельзя исключить наличие данного заболевания и при отрицательных результатах тестов, и необходимо произвести тест на присутствие грибковой культуры (см. ниже). В поисках дерматофитов желательно взять пробы волос, флюоресцирующих под лампой Вуда.

Шерстный покров у здорового животного имеет ровную поверхность, в отдельных волосках легко можно различить наружный покров и сердцевину, а волос слегка сужается к его концу. Пораженный волос имеет неровную поверхность, в волосках неразличимы наружный покров и сердцевина, а кончики волос часто по форме напоминают куст. Споры представляют собой округлые тела, образующие цепи или группы на поверхности волосяного стержня и имеющие от 3 до 8 мм в диаметре.

Трихография также помогает при диагностике невоспалительной алопеции у собак и кошек. Обследование кончиков и корней волос помогает определить, обусловлено ли выпадение волос поведением самого животного (из-за вылизывания или расчесывания вследствие зуда) или происходит по другим причинам (эндокринопатия, дистрофия луковицы волоса).

Если у волос большие пигментированные корни округлой формы, мягкие и растянутые на вид, изогнутые вследствие выдергивания (стадия анагена, наблюдаемая у нормально растущих волос), наряду с ломкостью кончиков волос, то, возможно, это является следствием самовылизывания и расчесов. Если большая часть или все корни тонкие, имеют форму палки, прямые и непигментированные (стадия телогена, характерная для нерастущего волоса в стадии отдыха), концы волос обычно сужены, то алопеция, по всей вероятности, происходит вследствие метаболических (например, гормональных) нарушений.

В некоторыхтлучаях фолликулярной дисплазии или гнездной (очаговой) алопеции могут наблюдаться патологические деформированные волосяные луковицы (по сравнению с луковицами, взятыми у здоровой собаки той же породы и в тот же период линьки). Наблюдения за волосяным стержнем помогут установить алопецию с ослаблением окраса шерстного покрова.

При здоровом волосяном покрове пигментированные гранулы меланина равномерно распределены по всему стержню, придавая шерсти однородный цвет. При алопеции с ослаблением цвета волоса пигментированные гранулы меланина группируются в макромеланосомы, которые искривляют и разрывают волосяную кутикулу. Эти пигментные нарушения заметны в волосе, собранном со всех участков тела, даже при желтой и рыжей окраске волоса, при которой не бывает алопеции.

Нарушения в центральной части волосяного стержня, такие как нарушение формы или разрыв кутикулы, могут наблюдаться в случаях недостаточного питания или повторных травм, причиненных волосам (от чрезмерного расчесывания), или при редком заболевании под названием Trichorrehexisnodosa. При заболеваниях с образованием угревой сыпи и гиперкератозе (включая эндокринопатию, аденит сальных желез, демодекоз и витамин А-зависимый дерматоз), при возникновении кератиновых фолликулярных слепков, присущих волосяным стержням, эти нарушения надо отличать от дерматофитных гиф и спор.

Можно увидеть гниды вшей и яйца Cheyletiella, прикрепленные к волосяному стержню, причем последние гораздо меньших размеров и держатся на стержне менее крепко, чем первые.

Внимание!

Мы рекомендуем не мыть вашего питомца за 2-3 дня до посещения врача-дерматолога, а также не промывать/чистить уши. Вы рискуете исказить клиническую картину и исказить результаты диагностических исследований.

Так как врачу-дерматологу очень важно не только осмотреть пациента, но и получить достаточно информации о нем, постарайтесь прийти на прием самостоятельно, а не просить о помощи друзей или родственников не участвующих в жизни вашего питомца.

Микроскопическое исследование чешуек

Микроскопическое исследование чешуек и остатков кожного покрова позволяет установить некоторых эктопаразитов, таких как блохи, Cheyletiella и вши. Чешуйки можно собрать, если поместить животное на черную или коричневую бумагу, быстро провести против шерсти и собрать все, что упало на бумагу. Или можно воспользоваться расческой для вычесывания блох с 12 зубьями на сантиметр.

Собранный материал нужно смешать с вазелиновым маслом, хлорфенолаком или раствором КОН (см. выше), прикрыть покровным стеклом и посмотреть его под микроскопом. Клещи Cheyletiella, вши, яйца и экскременты блох можно легко распознать при четырехкратном увеличении. Получить сразу большое количество чешуек можно с помощью метода флотации.

Собранный материал в течение короткого времени подогревают в небольшом количестве 10% КОН, затем погружают в насыщенный раствор сахара или в флотационную среду для исследования фекалий, а затем центрифугируют. Всплывающие на поверхность частицы собирают пипеткой и помещают на предметное стекло, прикрывают покровным стеклом и исследуют при 4-кратном увеличении. Данный метод особенно помогает, если имеются подозрения на наличие Cheyletiella, поскольку этих клещей обычно немного.

Чешуйки также можно собрать, прижимая полоску ацетатной липкой ленты по нескольку раз между отдельными волосками. Затем пленку прижимают к предметному стеклу липкой стороной вниз и смотрят под микроскопом. Данный метод также подходит для взятия себорейного материала после цитологического окрашивания (см. далее) для обнаружения Malassezia (Pityrosporon) на чешуйках кератина.

Цитологическое исследование

МетодикаПредметные стекла следует заранее протереть 70%-ным спиртом для улучшения адгезии пробы. В зависимости от вида повреждения применяются различные методы цитологического взятия проб. Метод получения материала путем аспирации тонкой иглой чаще всего применяется при плотных поражениях. После аккуратного выбривания места взятия материала и дезинфекции поверхности, в центральную часть поражения вводят иглу №21 с присоединенным к ней шприцом на 10 мл и стараются набрать содержимое поражения в количестве 2 мл, потянув на себя поршень шприца.

Не отпуская поршня шприца, иглу перемещают в разных направлениях внутри поражения (3-4 раза). Перед извлечением иглы из поражения поршень шприца отпускают для предотвращения поступления материала внутрь шприца. Затем иглу (содержащую пробу) отсоединяют от шприца, 10 мл воздуха набирают в шприц, после чего шприц снова соединяют с иглой.

И, наконец, собранный материал помещают на предметное стекло путем быстрого надавливания на поршень шприца. Если полученного материал слишком много или он слишком жидкий, его можно распределить на несколько предметных стекол. Аспирация с помощью шприца также производится для взятия проб из кист, абсцессов, больших везикул и пустул.

При открытых, экссудативных поражениях и жирных себорейных поверхностях, а также из свежих поверхностей разреза после кожной биопсии или удаленных узелков рекомендуется брать мазки-отпечатки. При данном методе предметное стекло просто несколько раз прижимают (не оставляя полос) к месту поражения. Аналогичным образом можно собирать гной из пустул и под корками на коже после предварительного аккуратного из вскрытия иглой №25.

Цитологические пробы можно брать в виде мазка из фистул, из областей с глубокой пиодермией, из наружного слухового прохода или увлажненным тампоном с жирной поверхности кожи. Тампоном с пробой затем осторожно проводят по предметному стеклу. Всем цитологическим пробам нужно дать высохнуть на предметном стекле.

Предметные стекла с пробами сальных желез или воском или пробами, собранными увлаженным тампоном, нужно перед окрашиванием слегка подогреть на огне спиртовой горелки, В цитологии чаще всего используются быстрые красители, в том числе модифицированные красители Райта (Diff-Quik, Hemacolor) и новый метиленовый синий.

После окрашивания предметные стекла быстро промывают водопроводной водой, дают высохнуть и исследуют под микроскопом с 10-, 40- и 100-кратным увеличением под инверсией. Чтобы полученный препарат сохранялся дольше, можно приклеить покровное стекло на предметное стекло специальным клеем (например, Eukittили Accu-Mount60, BaxterHealthcareСогр.). Препараты на ацетатной ленте также надо окрасить, промыть и прижать к предметному стеклу микроскопа клейкой стороной к стеклу.

ИнтерпретацияИсследование проб, взятых из узелков, помогает выявить наличие воспаления (такие клетки, как нейтрофилы, макрофаги, лимфоциты и клетки плазмы крови) или неоплазии. В воспалительном экссудате часто можно обнаружить присутствие бактерий и оценить их количество, форму и местоположение (внутриклеточные или внеклеточные).

При цитологическом исследовании видимые бактерии обычно являются кокками (в основном Staphylococcus). В редких случаях можно наблюдать палочки или смешанные инфекции (кокки и палочки). Палочки невозможно идентифицировать при помощи одного цитологического метода; поэтому для обнаружения внутриклеточных палочек или смешанных инфекций нужен анализ бактериальной культуры.

Лишь внутриклеточные бактерии (обычно в дегенеративных утолщенных нейтрофилах) свидетельствуют о наличии пиодермии. Во многих случаях глубокой пиодермии наблюдается мало внутриклеточных бактерий, но обнаружено много нейтрофилов и макрофагов, а также некоторое число лимфоцитов и клеток плазмы. Присутствие внеклеточных бактерий говорит о заражении или об очень поверхностной пиодермии (например, «горячих пятнах»).

Дрожжевая инфекция Malassezia редко присутствует в пробах, взятых со здоровой кожи, но она может находиться в пробах, взятых из здорового слухового прохода, и в обильном количестве содержится в пробах, взятых при жирной себорее или церуминальном отите. Эти дрожжевые грибы обладают гораздо большей величиной, чем большинство бактерий, по форме напоминают бутылку или земляной орех (проросшие дрожжи), и при окрашивании их цвет меняется от светло-голубого до темно-фиолетового при наблюдении проб, окрашенных модифицированным красителем Райта.

Malassezia всегда бывает внеклеточной и часто прилипает к корнеоцитам. В пробах, взятых с кожи или из лимфатических узлов, иногда встречаются и другие микроорганизмы, например возбудители глубокой грибковой инфекции или Leishmania. При предполагаемом криптококкозе очень полезно смешать каплю черных китайских (или индийских) чернил с экссудатом для определения капсулы муцина, которая четко выделяется на темном фоне.

Стерильные пустулы с хорошо выраженными нейтрофилами, различным количеством эозинофилов и акантолитическими клетками с большой вероятностью указывают на пемфигоидный комплекс. Акантолитические клетки представляют собой маленькие темные округлые кератиноциты базального или шиповидного слоя, которые отделяются от окружающих клеток вследствие разрыва внутриклеточных соединений.

Клетки-родоначальники больших размеров с прямыми краями и углами нельзя считать акантолитическими клетками, это обычные десквамативные корнеоциты. Настоящих акантолитических клеток особенно много у кошек при пузырчатке, и для них характерны массовые скопления. Некоторое количество акантолитических клеток иногда наблюдается в пустулах вследствие бактериальной инфекции.

В этом случае они не так многочисленны и не скапливаются в больших количествах, и бактерии ясно видны внутри нейтрофилов. Бактерии наряду с акантолитическими клетками также наблюдаются в пробах, взятых из-под корок при пузырчатке, которая вероятнее всего является вторичной инфекцией. В таких осложненных случаях желательно выполнить несколько биопсий кожи и направить их дерматопатологу для окончательного диагноза.

Эозинофилы, основной тип клеток, выявляются в поражениях при эозинофильном гранулематозном комплексе у кошек, при эктопаразитозах (чесотка, блохи, назальная пиодермия вследствие укусов членистоногих), у собак иногда из-за корма или контактной аллергии и в редких случаях при стерильных эозинофильных пустулёзных высыпаниях.

Зрелые поверхностные корнеоциты встречаются в пробах, взятых с поверхности кожи, или при аспирационной биопсии из фолликулярных кист. Эти корнеоциты представляют собой большие плоские светло-голубые безъядерные клетки с острыми краями, которые кажутся темно-синими, если располагаются в форме сигареты.

Исследование с помощью лампы Вуда

Исследование кожи и шерстного покрова при помощи лампы Вуда помогает при диагностике дерматофитии, вызванной Micmsporumcanis. Лампа Вуда дает ультрафиолетовое свечение с длиной волны 253,7 нм, проходящее через кобальтовый или никелевый фильтр. Желательно использовать лампы с увеличительным стеклом. Исследование должно производиться в совершенно темной комнате.

Чтобы лампа излучала требуемую длину волны, ей нужно дать подогреться в течение 5-10 минут. Лучше всего провести это время в темноте, чтобы дать привыкнуть глазам. Почти 50% штаммов М. canisфлюоресцируют под действием УФ излучения в результате образования метаболитов триптофана. Положительная флюоресценция обычно дает характерную яблочно-зеленую окраску и может наблюдаться у корней волос наподобие манжеты, обрамляющей интрафолликулярные и экстра фолликулярные участки волосяного стержня.

Часто волос, дающий положительное свечение, бывает ломким на внешней части поражения. Иногда можно увидеть чешуйки, говорящие о наличии заболевания. Ложноположительное свечение имеет другой цвет (белый, светло-голубой) и бывает вызвано чешуйками, остатками шерсти, нанесением препаратов, бактериями (Pseudomonas) или закупоривающей массой кератина вокруг волосяного стержня.

Для подтверждения положительного анализа желательно собрать флюоресцирующий волос, исследовать его под микроскопом на наличие грибковой инфекции (см. выше) и использовать часть пробы для посева грибковой культуры.На некоторые грибковые штаммы нужно освещать в течение нескольких минут, пока они не дадут характерного свечения.

Таким образом, нужно держать лампу над областью поражения по крайней мере в течение 5 минут, прежде чем прийти к выводу, что тест является отрицательным. Половина штаммов М. canisи все виды Trichophyton, заражающие домашних животных, не дают свечения, поэтому отрицательный тест, полученный при исследовании с помощью лампы Вуда, не исключает наличие дерматофитии. В сомнительных случаях следует взять провести культивирование на грибы.

Культивирование грибов

Культивирование грибов имеет важное значение, если есть подозрение на дерматофитию, а трихография и исследование с помощью лампы Вуда дали отрицательный результат. Во избежание усиления контаминации пораженный волос зажимают на расстоянии 1 см от кожи и место поражения слегка дезинфицируют 70%-ным спиртом, а затем дают высохнуть.

После этого ломкий и светящийся волос, а также чешуйки и шерсть на внешней части поражения собирают стерильными гемостатическими зажимами и помещают либо в небольшой бумажный конверт для последующей инокуляции, либо вносят сразу в питательную среду. Нужно следить за тем, чтобы как можно больше собранной пробы находилось в контакте с питательной средой, так как только из спор, соприкасающихся со средой, может развиться мицелий гриба.

Для животных с отсутствием поражений (особенно у кошек с отсутствием симптомов, которые предположительно считаются переносчиками заболевания, или у животных, у которых производится последующее высевание культуры после курса лечения) желательно применять метод Мак-Кензи с использованием зубной щетки.

Можно использовать новые зубные щетки в индивидуальных пакетах, поскольку благодаря их оригинальной упаковке они обычно микологически стерильны. Нужно расчесать все тело животного, в особенности участки, предрасположенные к дерматофитии, такие как область морды, ушных раковин и передних лап. Также нужно осторожно собрать небольшое количество волос с зубной щетки.

Измельченные когти животного и остатки кожи, собранные кюреткой с когтевого ложа или под вогнутой передней частью когтя, также нужно исследовать на наличие грибковой культуры. Следует избегать инокуляции экссудатов и проб, недавно подвергнутых местной противогрибковой терапии. Чашки Петри и бутылки с внесенным в них материалом необходимо держать неплотно закрытыми и хранить при комнатной температуре (20-25 °С) в темноте, при относительной влажности не выше 30%.

Коробка из-под обуви со стаканом воды внутри может служить хорошим домашним инкубатором. Посевы следует внимательно осматривать ежедневно в течение по крайней мере 14 дней. Если по прошествии 2 недель не видно роста культуры, она считается отрицательной.Наиболее часто применяемой средой для культивирования является питательная среда на дерматофиты (DTM).

Среда содержит гентамицин и хлортетрациклин, убивающие бактерии, а также циклогексимид, задерживающий рост сапрофитных грибков. Некоторые патогенные грибки, такие как Cryptococcus, некоторые виды Aspergillus, Zymomycota и возбудители феогифомикоза чувствительны к циклогексимиду и не растут в данной питательной среде.

DTM также содержит фенол красный в качестве индикатора pH, который в щелочной среде меняет желтый цвет на красный. Дерматофитные грибы вначале используют протеины в качестве питания, образуя при этом щелочные метаболиты, которые и вызывают красный цвет индикатора, как только будет замечен рост мицелия.

Сапрофитные грибы потребляют углеводы, вначале образуя кислотные метаболиты, при которых цвет индикатора остается желтым. В конечном итоге при достаточно длительном выращивании культуры (10 дней и более) и обеднении данной среды углеводами сапрофитные грибы также начнут использовать протеины в качестве питания, и цвет индикатора изменится на красный.

Важно отметить, что при наличии сапрофитных грибов изменение цвета среды произойдет после того, как разовьется мицелий и будет ясно видимой в течение нескольких дней. Поэтому нужно ежедневно следить за ростом культуры, высеянной на наличие грибковой микрофлоры, и изменением цвета индикатора. Поскольку другие грибы, такие как Blastomyces, Sporothrix, Histo-plasma, Coccidioid.

es, и некоторые виды Aspergillus также быстро придают DTM среде красный цвет, необходимо произвести макроскопическое и микроскопическое исследование культуры для определения видовой специфичности грибов. Макроскопическое исследование верхней и нижней поверхности части культуры лучше всего производить при инокуляции пробы или при взятии параллельных проб от субкультуры на агар Сабуро и на агар с DTM.

https://www.youtube.com/watch?v=ytcreatorsde

Микроскопическое исследование макроконидий лучше всего производить не ранее чем через 5-7 дней после первого наблюдения роста мицелия, желательно на среде Сабуро. В продаже представлены среды с быстрым спорулированием, но их преимущества вызывают сомнение. Кусок чистой ацетатной ленты осторожно прижимают к поверхности колонии так, чтобы ее часть прилипла к ленте.

Ленту кладут на каплю коттона синего лактофенола клейкой стороной вниз на предметное стекло микроскопа и исследуют под микроскопом при 10- и 40-кратном увеличении. У макроконидий Macrosporumcanisформа веретена с толстыми стенками из шести и более клеток и шишкообразные окончания. У Microsporumgypseum макроконидии в форме веретена с тонкими стенками, без шишкообразных окончаний и шесть или менее клеток.